利用徕卡LMD研究冠状病毒对细胞NF-κB信号通路和染色质分布的影响

细胞接种在加入2μm 青霉素（PEN）的30mm的圆形培养皿中。

免疫染色和LMD按照预定方案*进行，并进行如下修改。

处理结束时，细胞用Hank's平衡盐溶液(HBSS)洗涤2次，每次5分钟，并用2ml乙醇固定5分钟。

在HBSS中洗涤30秒，然后用2ml HBSS /0.1% Saponin加10%驴血清封闭，孵育3分钟。

稀释1:50的N蛋白抗体或1:400的P(S2)-pol II，在含0.1%皂素的400μm Hank’s BSS中37℃孵育。

用Hank’s BSS/0.1%皂素洗涤30秒。

用y3抗体(1:50)和Dylight488二抗(1:400)，室温400μl HBSS/0.1% Saponin。

在2 ml HBSS中洗涤3次，每次30秒，然后在2ml DEPC水中洗涤30次，然后在40℃干燥30分钟。

使用Leica LMD6000系统将未感染的细胞和感染的细胞切除并收集在微量离心管中，用荧光显微镜检测。

从病理样本、细胞样本或涂片中，采用激光切割、分离收集特定染色体，细胞，组织，从而进行JZ细胞的下游基因组、转录组、蛋白组、或代谢组水平的分析及验证。

可应用于特定的单个染色体、细胞、整个组织区域，甚至骨骼、牙齿、大脑、植物等的切割分离。ZL重力非接触收集模式（ZL号：DE 10057292, EP 1207392, JP 3641454）JZ、无污染。可配备自动高通量切割及收集模式。操作过程中无需移动样品，而是通过ZL的激光光束任意扫描切割（ZL号：EP 1276586、US 7035004、JP 3996773），灵活又JZ。重力收集模式又很好地避免了样品污染。

采用独特的激光设计和易用的动态软件，高达5000 Hz脉冲的349nm，干净、GX的切割目标物边缘，而目标物体无需接触激光，不受影响。

采用普通的0.2或0.5ml离心管即可收集，耗材成本低。