共聚焦显微镜中针孔的作用是什么?
一、共聚焦显微镜对样品进行光学切片并做记录,切片刚好覆盖显微镜产生的景深是最理想的情况。
二、为了实现这一操作,样品被逐点扫描。可以产生的最小形状是衍射极限点。显微镜焦平面上形成的衍射极限光斑是点状光源的图像,因此称为“点扩散函数,psf”,用于描述光学设备成像极小光斑时焦点中的光分布情况。由于所有的传统光源通常不是点形的,而是有一个明显的延伸,光源投射在一个小孔(针孔)上作为点形光源。
三、在探测方面,传感器必须遵循相同的方式。也就是说,感测区域也应该是衍射极限点,始终与照明点重合。这可以通过类似设置实现:发射光通过一个微小的光圈,即检测针孔,然后由传感元件记录。当我们在共聚焦显微镜中提到“针孔”时,通常是指这个针孔。
四、术语“共聚焦”指的是这种设置:照明和探测都聚焦在同一个点上[2]typo3/,焦点共轭。像上个世纪电视屏幕上的电子束一样,通过逐点扫描视野来生成图像。扫描通常由一组可旋转的反射镜来完成。
五、检测针孔去除了所有来自非焦平面的发射。因此它也被称为“空间滤波器”,阻断焦外信号。由于这种装置实现了光学切片的效果,所以又称为“光刀”。
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