一、共聚焦显微镜是近代生物医学图像仪器Z重要的发明之一。以激光为光源,在传统的荧光显微镜成像的基础上加装了激光扫描装置,并利用计算机进行图像处理,将光学成像的分辨率提高了30% ~40%。经过处理后,可以观察到细胞或亚细胞水平的荧光图像,并对样品开展全面、细致的研究。
二、目前,共聚焦显微镜在细胞生物学中的应用主要有以下方面:
①定量荧光测量;
②定量共聚焦图像分析;
③三维重组分析生物结构;
④动态荧光测定;
⑤荧光光漂白回复测定活细胞的动力学参数等。
三、共聚焦显微镜主要用于具有荧光样品的测定,因此对于没有自发荧光的生物样品,就需要对样品进行前处理,使其具有荧光标记,再进行检测。能否用共聚焦显微镜顺利地观察到样品的荧光图像以及观察到图像质量的好坏,在很大程度上取决于样品的前处理技术。
四、因此,对样品进行的前处理应该具有荧光标记反应特异性强,荧光定位准确、强度适宜,不破坏样品的结构、形态,对试验结果无干扰等特征。此外,还应根据试验材料、试验目的、需检测的指标等确定合适的样品前处理技术。
在线留言