一、激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。系统经一次调焦,扫描限制在样品的一个平面内。调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的图像,这些图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显示细胞样品的立体结构。
二、在结构配置上,激光扫描共聚焦显微镜除了包括普通光学显微镜的基本构造外,还包括激光光源、扫描装置、检测器、计算机系统 (包括数据采集、处理、转换、应用软件)、图像输出设备、光学装置和共聚焦系统等部分 [2]。由于该仪器具有高分辨率、高灵敏度、“光学切片”(Optical sectioning)、三维重建、动态分析等优点,因而为基础医学与临床医学的研究提供了有效手段。此外,CLSM 对荧光样品的观察具有明显的优势,只要能用荧光探针进行标记的样品就可用其观察。
四、激光扫描共聚焦显微镜作为一项全新的实验手段和强有力的研究工具,为我们解决一些以往研究工作中不能解决的技术难题创造了条件,因而必将得到更为广泛的应用。随着新软件的不断开发及各个学科的不断发展和相互渗透,相信它还将会有更广阔的发展前景。
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