激光扫描共聚焦显微镜原理

       一、激光扫描共聚焦显微镜与普通显微镜相比，激光共聚焦采用了能到达 最 高分辨率及重复性的无色差扫描技术，能产生真正具有三维清晰度的图像，而且还可以处理活的标本并不对标本造成物理化学特性的破坏。

       二、 激光扫描共聚焦显微镜以激光作为光源激光器发出的激光通过照明针孔形成点光源，经过透镜、分光镜形成平行光后，再通过物镜聚焦在样品上，并对样品内聚焦平面上的每一点进行扫描。 样品被激光激发后的出射光波长比入射光长，可通过分光镜,经过透镜再次聚焦，到达探测针孔处被后续的光电倍增管检测到，并在显示器上成像得到所需的荧光图像而非聚焦光线被探测针孔光栏阻挡。

       三、在普通宽视野光学显微镜中，整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明,图像可以用肉眼直接观察。同时 ,来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大,尤是标本的厚度在2um以上时,其影响更为明显。

       四、它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激光荧光探针，利用计算机进行图像处理，不仅可观察固定的细胞、组织切片，还可对活细胞的结构、分子、离子进行实时动态地观察和检测。激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究，并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研究手段，结合其他相关生物技术，在形态学、生理学、免疫学、遗传学等分子细胞生物学领域得到广泛应用。